達雅高科普|血液樣本品質直接影響基因檢測結果,如何預防溶血發生?返回
20 / 07 / 2021
確保基因檢測結果準確的關鍵是提供一個符合要求的合格樣本供實驗室化驗。
但在做DNA檢測時,血液樣本出現不合格(比如溶血)的情況並不少見。
樣本溶血會影響檢驗結果,由於要保證檢驗結果的真實性,因此對於溶血情況嚴重的標本不能使用,得重新進行采血。
為了保持檢測樣本的品質和避免受測者二次抽血的麻煩和痛苦,達雅高今天來講講如何盡可能地預防樣本溶血的發生。
什麼是樣本溶血?
其實就是血液樣本在採集、運送、儲存等過程中因為各種因素導致血液裡面的紅細胞破裂,使得血紅蛋白和細胞內成分擴散於血清中,血清呈現紅色。
當樣本溶血後,紅細胞破壞所釋放的血紅蛋白及其代謝產物可能會抑制Taq酶活性,使PCR擴增效率明顯降低,導致結果偏低。
造成樣本溶血的常見原因?
不正確的采血操作
-止血帶捆紮時間太長或者用力拍打穿刺部位而引起溶血。
-采血針型號選擇過小,導致抽血時間過長,可能造成標本溶血。
-采血部位用酒精或碘伏消毒後,在酒精/碘伏未完全揮發就進行穿刺,
標本容易發生溶血。
-將分次抽取的血液注入同一試管內而引起溶血。
抽血者過於緊張
受測者采血時如果太過緊張,容易導致血流不暢,使得抽血時間過長,容易引起溶血。
采血後未及時混勻或混勻過於劇烈
采血完成後立即溫柔顛倒混勻是一個重要步驟,以便於添加劑充分與血液接觸,若未及時混勻或混勻不充分容易造成溶血。
此外混勻過程過於劇烈,也容易造成血細胞被破壞而溶血。
不合格的抽血器具
真空采血管如果品質不合格負壓過大或者過小都會造成溶血。負壓相對較大,血液流入管內速度過快,紅細胞互相撞擊而破裂。
運送時過度震盪
血標本經過劇烈震盪會容易溶血。
保存溫度不當
全血樣本是不能冷凍保存的,以免造成溶血。
樣本放置過久
血液標本採集後,未及時送檢,放置時間過長,會導致溶血。
如何預防樣本溶血的發生?
選擇合適合格的真空采血管
一次性使用真空采血管的頭蓋顏色不同,在用途上是有差異的,可以根據不同的檢驗目的,選擇正確合格的采血管。
比如做無創產前基因檢測,靜脈采血時需要使用到添加了EDTA抗凝劑的紫頭采血管。
EDTA鹽(K2、K3 等)是通過結合血液中的鈣來防止血液凝固的,能保護細胞形態,因為其是一種對白細胞形態和血小板影響相對較小的抗凝劑。
血液採集、運輸、保存等過程要做到科學規範
- 使用正確尺寸的采血針頭(建議20-22G)。
- 使用前先檢查一下,確保采血管在有效期內。
- 正確使用止血帶,避免捆紮太緊或時間太長。
- 靜脈穿刺部位的皮膚消毒後,應等皮膚乾燥後再進行抽血。
- 選擇合適抽血部位,避免血腫部位,不要選擇過細的靜脈,容易血量不足,導致溶血。
- 抽血時避免產生大量氣泡。
- 根據采血管容量,要正確填充夠,因為當試管填充不足時,可能過高濃度的抗凝劑會對脆弱的紅細胞膜造成影響。
- 抽血完畢後,請立即將采血管輕輕倒置8-10次,使管內的抗凝劑與血樣充分混勻。切記不可強烈震盪,以免造成溶血。
- EDTA采血管的血液样本建议保存在4°C (或以产品标识为准),禁止冷冻。
- 抽血完毕后尽快送检,从采血至运输到实验室检测的时间至多不能超过7天。
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